牛ELISA試劑盒操作使用步驟是怎樣的

更新時間：2022-01-18

點擊次數(shù)：1925

　　牛ELISA試劑盒使用步驟是怎樣的：

　　1.即將進行試驗的版孔進行設(shè)定好，規(guī)范品5個點，每個點設(shè)定平行，需求用到10個孔，空白只需1個孔。剩下孔能夠做為樣本孔

　　2.稀釋規(guī)范，準(zhǔn)備好5個EP管，然后在每個EP管中參加150微升規(guī)范稀釋液，編上編碼，分別為1，2，3，4,5，在1號管中參加150規(guī)范品，用槍頭重復(fù)吹打10次左右（留意操控起伏不要過大簡單發(fā)生氣泡）如果有渦旋儀能夠在渦旋儀上渦旋5秒左右，然后換槍頭，在1號管中取150微升參加到2號管，后面進程一次類推。終稀釋完，前面4個管中每管液體在150微升，5號管為300微升。濃度是從大到小。

　　3.規(guī)范、樣本、空白加樣：規(guī)范是每個濃度點2個孔（做平行），每孔參加50微升，加樣進程中留意換槍頭，樣本孔中每孔參加50微升，加樣進程中留意換槍頭，空白孔參加50微升蒸餾水。特別要闡明的是，規(guī)范加樣和樣本加樣盡量操控在15分鐘內(nèi)加完，如果時刻拖的太長，會導(dǎo)致前面孔先反響后面孔才開端反響，這樣數(shù)值誤差過大。加完樣后蓋上封板膜，至37攝氏度孵育30分鐘.

　　4.洗版，在孵育進程中能夠?qū)⑾礈煲号浜茫?0ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或許去離子水定容到600ml即可。每孔參加250-300微升的洗滌液（不要漫過版孔），（如果有震動儀的話，能夠講板子放入震動儀上5秒左右，然后靜止三十秒，沒有請疏忽次進程）將板子在桌子上晃動5秒左右，然后靜置30秒，甩干，決定。闡明：甩干進程盡量要快，1秒內(nèi)就能夠完結(jié)，不要漸漸歪斜倒掉液體，直接翻板甩掉液體即可。決定進程需求在桌子上墊一層吸水紙或許濾紙，版孔朝下拍幾下，拍干差異主要看吸水紙和濾紙上沒有顯著的水漬為完結(jié)。

　　5.每孔參加50微升的酶標(biāo)試劑，此處在空白孔中不需求加（空白孔為空），孵育30分鐘。

　　6.洗版進程與4一樣。

　　7.顯色，先每孔中參加50微升的顯色A液，然后每孔中參加50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘

　　8.停止，每孔參加50微升的停止液，留意，加完停止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù)，超越時刻讀數(shù)無效。在規(guī)則時刻內(nèi)讀數(shù)都是有用的。